1. Sato G, Shirasawa N, Sakuma E, Sato Y, Asai Y, Wada I, Horiuchi O, Sakamoto A, Herbert DC, Soji T. Intercellular communications within the rat anterior pituitary XI: An immunohistochemical study of distributions of S-100 positive cells in the anterior pituitary of the rat. Tissue Cell. 37(4): 269-280. 2005 PMID: 15921714
2. Sato Y, Hashitani H, Shirasawa N, Sakuma E, Naito A, Suzuki H, Asai Y, Sato G, Wada I, Herbert DC, Soji T. Intercellular communications within the rat anterior pituitary XII: Immunohistochemical and physiological evidences for the gap junctional coupling of the folliculo-stellate cells in the rat anterior pituitary. Tissue Cell. 37(4): 281-291. 2005 PMID: 15979114
1. Yamamura H, Ugawa S, Ueda T, Shimada S. Evans blue is a specific antagonist of the human epithelial Na+ channel delta-subunit. J Pharmacol Exp Ther. 315(2):965-9, 2005
2. Yamamura H, Ugawa S, Ueda T, Nagao M, Shimada S. Icilin activates the delta-subunit of the human epithelial Na+ channel. Mol Pharmacol. 68(4):1142-7, 2005
3. Ichimura T, Yamamura H, Sasamoto K, Tominaga Y, Taoka M, Kakiuchi K, Shinkawa T, Takahashi N, Shimada S, Isobe T. 14-3-3 proteins modulate the expression of epithelial Na+ channels by phosphorylation-dependent interaction with Nedd4-2 ubiquitin ligase. J Biol Chem. 280:13187-13194, 2005
4. Matsunaga N, Ozeki H, Hirabayashi Y, Shimada S, Ogura Y. Histopathologic evaluation of the internal limiting membrane surgically excised from eyes with diabetic maculopathy. Retina. 25:311-316, 2005
5. Ugawa S, Ueda T, Yamamura H, Shimada S. In situ hybridization evidence for the coexistence of ASIC and TRPV1 within rat single sensory neurons. Mol Brain Res.136(1-2):125-33, 2005
6. Okabe K, Kimura H, Okabe J, Kato A, Shimizu H, Ueda T, Shimada S, Ogura Y. Effect of benzalkonium chloride on transscleral drug delivery. Invest Ophthalmol Vis Sci. 46(2):703-8, 2005
現在進行中のプロジェクト
１）日本充血吸虫卵の成熟と高HDL血症
２）LCAT欠損マウスABCA1欠損マウスを用いたコレステロール代謝平衡に関する検討
３）CETP導入マウスによるヒト型リポタンパク質モデルマウスを用いたコレステロール代謝平衡の検討
４）薬剤投与による低コレステロール血症マウスモデルを用いた検討
５）アポE欠損マウスを用いた脳内コレステロール輸送の検討
６）ＰＰＡＲα欠損マウスを用いたＨＤＬ産生機構の検討
１.Tsujita M, Wu CA, Abe-Dohmae S, Usui S, Okazaki M, Yokoyama S. On the hepatic mechanism of HDL assembly by the ABCA1/apoA-I pathway. J Lipid Res. 2005 Jan;46(1):154-62.
２.Hayashi M, Abe-Dohmae S, Okazaki M, Ueda K, Yokoyama S. Heterogeneity of high density lipoprotein generated by ABCA1 and ABCA7. J Lipid Res. 2005 Aug;46(8):1703-11.
３. Ito J, Nagayasu Y, Lu R, Kheirollah A, Hayashi M, Yokoyama S. Astrocytes produce and secrete FGF-1, which promotes the production of apoE-HDL in a manner of autocrine action. J Lipid Res. 2005 Apr;46(4):679-86
４．Arakawa R, Tamehiro N, Nishimaki-Mogami T, Ueda K, Yokoyama S. Fenofibric acid, an active form of fenofibrate, increases apolipoprotein A-I-mediated high-density lipoprotein biogenesis by enhancing transcription of ATP-binding cassette transporter A1 gene in a liver X receptor-dependent manner. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2005 Jun;25(6):1193-7.
実験病態病理学では、主に前立腺癌・乳癌・肝癌を中心に発がん過程から転移に至る多段階発がんメカニズムの解析および多種多様な因子の発がん修飾作用を追究している。また環境中の化学物質などのヒトへの健康に対する影響を評価するリスクアセスメントにも力を入れている。これらの研究には動物個体を用いたin vivoの研究を主体とし、必要に応じてin vitroでの細胞を用い、遺伝子発現と蛋白発現レベルで分子生物学的手法を十二分に活用している。
我々は、これらの研究を通して、人体病理学から学んだ多くの成果の実験的研究に、また逆に実験によって得られた数々の情報をヒト癌の原因、予防に反映させることを常に念頭に置きながら研究を進めている。
１．前立腺癌の発がん機構ならびに発がん抑制に関する実験的追究
ラット前立腺癌モデルとして発がん物質を投与するモデルを２種類確立した。これに加えて、最近Probasin-SV40Tag遺伝子導入ラットを作成に成功し、前立腺癌が早期より発生することを確認している。これらの独自に開発した３種類のモデルを用いて（１）前立腺発がん機構解明、（２）アンドロゲン依存性あるいは非依存性の機構解明、（３）前立腺発がん化学予防方法の確立に向けての研究を行っている。
２．前立腺癌の骨転移機構の解析およびその抑制に関する実験的追究
ラットに化学発癌物質を用いて誘発した前立腺癌組織から、同種のラットに移植可能なラット前立腺癌組織を樹立した。その前立腺癌を頭蓋骨の直上に移植したところ、tumor bone interface (TB-interface)において、ヒト前立腺癌の骨転移巣を正確に反映した組織像が観察できた。我々は骨微小環境であるTB-interfaceとその対照群としての非先進部(Tumor alone area, TA-area)を比較することで、骨微小環境に特徴的な腫瘍細胞のメカニズムを検討することが可能となり、MMP7の役割やBisphosphonateによる抑制効果を発表してきた。
３．細胞間コミュニケーションの発がんへの関与の解析_
従来より細胞間コミュニケーションの異常は多くのがん細胞で報告されてきた。 我々は肝細胞の細胞間コミュニケーションが欠失した遺伝子改変ラットの作成に成功した。この遺伝子改変ラットは無処置ではほぼ正常の形態、寿命を全うする。肝への毒性物質に対する障害作用および発がん感受性など肝の様々な病態における細胞間コミュニケーションの役割とそれに関与する遺伝子の関与について追求している。これらの基本データは前立腺発がん研究にも応用している。
４．乳癌の発がん解析ならびに発がん抑制_に関する実験的追究
乳癌モデルとして、Ras遺伝子を導入したトランスジェニックラットおよびヒト培養細胞株を用いて発がんのメカニズム解析および乳腺発がん物質、発がん抑制物質同定のための検索系の確立をめざしている。
５．トキシコゲノミクス
最近環境化学物質のヒトへのリスク評価の新しい手法としてToxicogenomicsの研究が進められつつある。ToxicologyとGenomicsを合体したもので、各種毒性を示す化学物質の同定と毒性発現のメカニズムを同時に解析する強力な手法として注目されている。メカニズムを基礎にしてヒトへのリスクの外挿をより正確な信頼あるものに出来ると期待されている。本研究室では発がん物質とりわけ非変異原性発がん物質の早期同定を目標に、他機関との共同研究でToxicogenomicsの研究を進めている。この手法を用いて動物実験データのヒトへの外挿に有益な情報となるべく基礎的研究も進めている。
1. Ichihara, T., Miyashita, K., Kawabe, M., Imaida, K., Asamoto, M., Ogiso, T., Tamano, S., Hirose, M., Shirai, T.: Lack of combination hepatocarcinogenicity of harman, norharman and amitrole when given with NaNO2 in the rat. J. Toxicol. Sci. 30: 1-6, 2005.
2. 白井智之: cDNAマイクロアレイを用いた4週間投与による化学物質の肝発がん性予測. 臨床薬理. 36: 8-9, 2005.
3. Ito, A., Asamoto, M., Hokaiwado, N., Takahashi, S., Shirai, T.: Tbx3 expression is related to apoptosis and cell proliferation in rat bladder both hyperplastic epithelial cells and carcinoma cells. Cancer Lett. 219: 105-112, 2005.
4. 白井智之: イソフラボンの前立腺癌化学予防作用. 日本がん予防研究会. 43: 6-7, 2005.
5. Ichihara, T., Tamano, S., Yoshino, H., Imaida, K., Ishikawa, H., Kakizoe, T., Shirai, T.: Lack of chemoprevention or promotion effects of docosahexaenoic acid on small intestine, colon, liver, lung, thyroid, esophagus, kidney, and forestomach carcinogenesis in a rat medium-term multi-organ carcinogenesis model. J. Toxicol. Pathol. 18: 53-59, 2005.
6. Ichihara, T., Imai, N., Toda, Y., Hagiwara A., Tamano, S., Shirai, T.: Evidence of a threshold dose for promotion of hepatocarcinogenesis by hexachlorobenzene in a rat medium-term liver bioassay. J. Toxicol. Pathol. 18: 7-11, 2005.
7. Lynch, C., Hikosaka, A., Acuff, H., Martin, M., Kawai, N., Singh, R., Vargo-Gogola, T., Begtrup, J., Peterson, T., Fingleton, B., Shirai, T., Matrisian, L., Futakuchi, M.: MMP-7 promotes prostate cancer-induced osteolysis via the solubilization of RANKL. Cancer Cell. 7: 485-496, 2005.
8. Ogawa, K., Asamoto, M., Suzuki, S., Tsujimura, K., Shirai, T.: Downregulation of apoptosis revealed by laser microdissection and cDNA microarray analysis of related genes in rat liver preneoplastic lesions. Med. Mol. Morphol. 38: 23-29, 2005.
9. Yamashita, S., Suzuki, S., Nomoto, T., Kondo, Y., Wakazono, K., Tsujino, Y., Sugimura, T., Shirai, T., Homma, Y., Ushijima, T.: Linkage and microarray analyses of susceptibility genes in ACI/Seg rats: A model for prostate cancers in the aged. Cancer Res. 65: 2610-2616, 2005.
10. Fukushima, S., Wanibuchi, H., Morimura, K., Nakae, D., Tsuda, H., Imaida, K., Shirai, T., Tatematsu, M., Tsukamoto, T., Hirose, M., Furukawa, F.: Lack of potential of low dose N-nitrosodimethylamine to induce preneoplastic lesions, glutathione S-transferase placental form-positive foci, in rat liver. Cancer Lett. 222: 11-15, 2005.
11. Sugiura, S., Asamoto, M., Hokaiwado, N., Hirose, M., Shirai, T.: Harman and norharman suppressed but NaNO2 enhanced the development of preneoplastic liver cell foci in 2-amino-3,8-dimethylimidazo[4,5-f]quinoxaline (MeIQx)-treated rats. J. Toxicol. Pathol. 18: 99-104, 2005.
12. Ikeda, Y., Cho, Y.-M., Takahashi, S., Tang, M., Asamoto, M., Ogawa, K., Shirai, T.: Equivocal impact of transplacental and lactational exposure to a food-derived carcinogen, 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine, on prostate and colon lesion development in F344 rats. Cancer Lett. 224: 23-30, 2005.
13. Kandori, H., Suzuki, S., Asamoto, M., Murasaki, T., Tang, M., Ogawa, K., Shirai, T.: Influence of atrazine administration and reduction of calorie intake on prostate carcinogenesis in probasin/SV40 T antigen transgenic rats. Cancer Sci. 96: 221-226, 2005.
14. Kawai, N., Ito, A., Nakahara, Y., Futakuchi, M., Shirai, T., Honda, H., Kobayashi, T., Kohri, K.: Anticancer effect of hyperthermia on prostate cancer mediated by magnetite cationic liposomes and immune-response induction in transplanted syngeneic rats. Prostate. 64: 373-381, 2005.
15. Zhao, L., Futakuchi, M., Suzuki, S., Ohhara, Y., Hashimoto, T., Suzuki, T., Manabe, T., Shirai, T.: Kinetics of marked development of lung metastasis of rat prostatic carcinomas transplanted in syngeneic rats. Clin. Exp. Metastasis. 22: 309-318, 2005.
16. Kuribayashi, M., Wang, J., Fujiwara, O., Doi, Y., Nabae, K., Tamano, S., Ogiso, T., Asamoto, M., Shirai, T.: Lack of effects of 1439 MHz electromagnetic near field exposure on the blood-brain barrier in immature and young rats. Bioelectromagnetics. 26: 578-588, 2005.
17. Yoshino, H., Futakuchi, M., Cho, Y.-M., Ogawa, K., Takeshita, F., Tamano, S., Shirai, T.: Modification of an in vivo lung metastasis model of hepatocellular carcinoma by low dose N-nitrosomorpholine and diethylnitrosamine. Clin. Exp. Metastasis. 22: 441-447, 2005.
18. 朝元誠人: 発がん性と毒性におけるギャップ結合蛋白コネキシンの役割−遺伝子導入ラットを用いた解析−. 名市大医誌. 56: 41-43, 2005.
19. Yoshino, H., Nabae, K., Doi, Y., Ichihara, T., Tamano, S., Suzuki, S., Shirai, T.: Lack of effects of gestational and lactational exposure to 4-Nonylphenol on PhIP-induced rat prostate carcinogenesis. J. Toxicol. Pathol. 18: 183-188, 2005.
20. Hokaiwado, N., Asamoto, M., Ogawa, K., Shirai, T.: Transgenic disruption of gap junctional intercellular communication enhances early but not late stage hepatocarcinogenesis in the rat. Toxicol. Pathol. 33: 695-701, 2005.
1. Harada N, Okajima K, Yuksel M, Isobe H. Contribution of capsaicin-sensitive sensory neurons to antithrombin-induced reduction of ischemia/reperfusion-induced liver injury in rats. Thromb Haemost., 93: 48-56, 2005
2. Molor-Erdene P, Okajima K, Isobe H, Uchiba M, Harada N, Okabe H. Urinary trypsin inhibitor reduces LPS-induced hypotension by suppressing tumor necrosis factor-alpha production through inhibition of Egr-1 expression. Am J Physiol Heart Circ Physiol., 288: H1265-71, 2005
3. Mizutani A, Murakami K, Okajima K, Kira S, Mizutani S, Kudo K, Takatani J, Goto K, Hattori S, Noguchi T. Olprinone reduces ischemia/reperfusion-induced acute renal injury in rats through enhancement of cAMP. Shock., 24: 281-7, 2005
4. Molor-Erdene P, Okajima K, Isobe H, Uchiba M, Harada N, Shimozawa N, Okabe H. Inhibition of lipopolysaccharide-induced tissue factor expression in monocytes by urinary trypsin inhibitor in vitro and in vivo. Thromb Haemost., 94:136-45, 2005
5. Harada N, Okajima K, Liu W. Rebamipide decreases the susceptibility of gastric mucosa to acid-induced injury in rats by inhibiting neutrophil activation. Dig Dis Sci., 50 Suppl 1: S56-62, 2005
1. Ota S, Kanazawa S, Kobayashi M, Otsuka T, Okamoto. TEstablishment of a simple and quantitative immunospot assay for detecting anti-type・collagen antibody using an infrared fluorescence imaging system (IFIS). Journal of Immunological Methods 299:189-198, 2005
2. Furuyama S, Mizutani J, Otsuka T, Wada I, Fukuoka M, Sakuma E, Otsuka Y, Herbert D.C, Soji T. Gap junctional network in rat dorsal root ganglion;localization of gap junctions in dorsal root ganglion and changes in their number after peripheral axotomy. Nagoya Medical Journal 47(2):93-102,2005
3. Kusabe T, Waguri-Nagaya Y, Tanikawa T, Aoyama M, Fukuoka M, Kobayashi M, Otsuka T, Asai K. The inhibitory effect of disease-modifying anti-rheumatic drugs and steroids on gliostatin-platelet-derived endothelial cell growth factor production in human fibroblast-like synoviocytes. Rheumatology International 25:625-630, 2005
4. Sato G., Shirasawa N, Sakuma E, Sato Y, Asai Y, Wada I, Horiuchi O, Sakamoto A, Herbert D.C, Soji T. Intercellular communications within the rat anterior pituitary. XI: an immunohistochemical study of distributions of S-100 positive cells in the anterior pituitary of the rat. Tissue and Cell research 37(1):269-280, 2005
5. Sato Y, Hashitani H, Shirasawa N, Sakuma E, Naito A, Suzuki H, Asai Y, Sato G, Wada I, Herbert D.C, Soji T. Intercellular communications within the rat anterior pituitary XII:immunohistochemical and physiological evidences for the gap junctional coupling of the folliculo-stellate cells in the rat anterior pituitary. Tissue and Cell research 37(4):281-291, 2005
1. 加齢黄斑変性の治療を目的とした研究。これまで脈絡膜新生血管（CNV）の発生にマクロファージが関与していることを報告してきた。研究室では、マウスのブルッフ膜をレーザーで穿孔させて作成したレーザー誘発CNVモデルを用いて、さまざまな薬剤のCNVへの抑制効果やその機序を調べている。評価方法としては、CNVの大きさ、血管新生に関与するサイトカインの発現、マクロファージの遊走状態などを比較検討することによって行っている。
2. 加齢黄斑変性の病態解明に関する研究。加齢により網膜色素上皮内に蓄積するリポフスチンは、最終糖化産物（AGE）などの酸化物質を多く含有する。家兎の網膜下にAGEを注入して網膜色素上皮に貧食させ、成人のリポフスチンが蓄積した状態を模倣すると、ドルーゼン様の沈着物が高率に出現し、時には網膜下および網膜色素上皮下に新生血管を生じることが分かった。今後は、加齢黄斑変性の原因遺伝子として注目されている補体因子H、Bをはじめ、補体、アミロイド、リポ蛋白などの役割について解明していく。
3. 網膜微小循環の研究。アクリジンオレンジという核染色色素を用いて白血球を染色し、scanning laser ophthalmoscope (SLO)のアルゴンレーザーで眼底を観察すると、染色された白血球を白色の蛍光点として認識することができる。白血球は様々な病態に関与しており、糖尿病、汎網膜光凝固、網膜虚血再灌流障害などのモデルをラットで作成し、この手法を用いて網膜微小循環における白血球動態を通して病態の解明を行っている。
研究業績
1. Okabe K, Kimura H, Okabe J, Kato A, Shimizu H, Ueda T, Shimada S, Ogura Y : Effect of benzalkonium chloride on transscleral drug delivery. Invest Ophthalmol Vis Sci 46 : 703-708, 2005
2. Hirata F, Yoshida M, Niwa Y, Okouchi M, Okayama N, Takeuchi Y, Itoh M, Ogura Y : Insulin enhances leukocyte-endothelial cell adhesion in the retinal microcirculation through surface expression of intercellular adhesion molecule-1. Microvasc Res 69 : 135-141, 2005
3. Kato A, Kimura H, Okabe K, Okabe J, Kunou N, Nozaki M, Ogura Y : Suppression of laser-induced choroidal neovascularization by posterior sub-tenon administration of triamcinolone acetonide. Retina 25 : 503-509, 2005
4. Matsubara A, Tamai K, Matsuda Y, Niwa Y, Morita H, Tomida K, Armstrong D, Ogura Y : Protective effect of polyethylene glycol-superoxide dismutase on leukocyte dynamics in rat retinal microcirculation under lipid hydroperoxide-induced oxidative stress. Exp Eye Res 81 : 193-199, 2005
1. Murakami, M., Ohba, T., Xu, F., Shida, S., Satoh, E., Ono, K., Miyoshi, I., Watanabe, H., Ito, H., and Iijima, T.: Genomic organization and functional analysis of murine PKD2L1. J. Biol. Chem., 280(7), 5626-5635, 2005.
2. 三好一郎：遺伝子組換え動物を用いた疾患モデル動物の開発および疾患原因遺伝子の 同定・機能解析．名古屋市立大学医学会雑誌 56(2-3)：29-40，2005．